一般测定中期黄体期的血清黄体酮水平反映黄体功能，当血清黄体酮≥9.54nmol/L(3ng/ml)时子宫内膜呈分泌期变化。不少研究发现排卵周期中黄体酮水平在9.54—31.8nmol/L(3—10ng/ml)，在中期黄体期黄体酮水平在31.8nmol/L(10ng/ml)，因此认为黄体酮<31.8nmol/L(10ng/ml)为黄体功能不足。但应注意黄体酮为脉冲式分泌，若取血时正值脉冲式分泌的低谷，则黄体酮水平可较低，为此有作者提出在预期的月经前第4、6、8天分别测定黄体酮水平，3次黄体酮值的平均值<47.7nmol/L(15ng/ml)为黄体功能不足。有作者发现黄体期的黄体酮水平在2—3小时内可有10倍的升降，认为多次标本测定可准确反映黄体分泌黄体酮的功能，但临床应用不方便。
尿中黄体酮代谢物孕烯二醇-3α-葡萄糖苷酸(pregnanediol-3α-glucuronide，PGD)与血中黄体酮水平相关，若收集一昼夜尿标本测定PGD水平能反映24小时的黄体分泌功能。因PGD随年龄和月经周期变化，故实用性有待进一步研究。
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