四杯定位细菌培养法是男性下尿路感染定位检测的金标准，对细菌前列腺炎的诊断有着独特的意义，然而其在临床实践应用中并非总是那么清楚和完善。
有学者认为在测试结果模糊时可反复进行前列腺按摩液的评估予以弥补。也有学者提出若前列腺按摩液或按摩后尿液中分离出非致病的凝固酶阴性的葡萄球菌，而前列腺液镜检中白细胞又不增高时则可以置之不管。
此外，还有学者认为在上尿路感染，膀胱尿液中存在有细菌时，为了避免感染的尿液污染尿道与前列腺分泌液，可以在事前24小时以上适当应用一些不易穿透前列腺的抗生素，如阿莫西林等，使膀胱内感染得以控制，而不影响结果分析。
一些学者认为前列腺按摩后，约有0.1ml前列腺液滞留于尿道，而5~10ml的按摩后尿液有可能将其稀释50~100倍，因而影响按摩后尿液的细菌计数，如果没有前列腺按摩液培养阳性菌种的佐证往往导致判断上的困难，因为按摩后尿液或前列腺按摩液的细菌计数较之膀胱初始尿至少要大于其10倍，最好是大于其100倍，才无可争辩地确立细菌性前列腺炎的诊断。
也有人并不接受上述观点，认为若膀胱初始尿及中段尿标本中每毫升细菌数不足3000，而前列腺按摩液或按摩后尿液中却大于每毫升5000，则高度提示细菌性前列腺炎的可能，并在5~7天后复查，若结果类似，则可确立诊断。
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