维生素B12主要生理功能是参与制造骨髓红细胞，当怀疑贫血由维生素B12缺乏引起时，可通过实验室检查协助诊断，常用方法主要包括以下几种：
(1)血清维生素B12测定：血清维生素B12的测定是最直接的鉴定方法，常用微生物法及放射免疫法，其中放射免疫法的敏感度和特异度均高于微生物法，在临床中应用广泛。
【判断标准】正常人血清维生素B12值为200～900pg/ml，低于100pg/ml诊断为缺乏。
(2)尿甲基丙二酸测定：维生素B12缺乏时体内甲基丙二酸量增多并从尿中大量排出，但叶酸缺乏时其排出量并不增加，常用于区分维生素B12缺乏和叶酸缺乏。
【判断标准】正常人尿中仅排出微量尿甲基丙二酸(0～3.5Mg/24H)，维生素B12缺乏时排出量明显高于3.5Mg/24H。
(3)维生素B12吸收试验：通过空腹口服57钴标记的维生素B120.5μg，2小时后肌注未标记的维生素B121Mg，收集24小时尿测定排出的放射性。
【判断标准】正常人排出的放射性钴应超过7%，低于7%表示维生素B12吸收不良，恶性贫血常在4%以下。
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