内分泌检查的最佳时间需根据检查项目而定，空腹检查项目通常在早晨8-10点，激素类项目需结合激素分泌节律选择特定时段。
肾上腺皮质醇、促肾上腺皮质激素等激素检测需在上午8-9点采集标本，此时处于分泌高峰期。生长激素、促甲状腺激素释放激素等需在特定刺激试验后定时采集。胰岛素释放试验要求空腹8小时后先采血，再分时段多次检测。性激素六项中卵泡刺激素、黄体生成素等建议在月经周期第2-4天检查，而孕酮检测宜在黄体中期进行。抗苗勒管激素检查对月经周期无特殊要求。对于需要空腹的项目，检查前需保持8-12小时禁食，期间可少量饮水。部分尿液激素检测需收集24小时全时段尿液标本。
检查前3天应避免剧烈运动、饮酒及激素类药物干扰。穿着宽松衣物方便采血，告知医生正在使用的药物及月经周期情况。长期激素治疗者需与医生沟通是否需要调整用药时间。备孕女性进行甲状腺功能检查时，建议同时检测促甲状腺激素受体抗体。糖尿病患者做内分泌检查时需携带降糖药物，防止长时间空腹引发低血糖。
